调教学生妹

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在挫伤性肠炎模子的构建经过中，最常用的引导剂葡聚糖硫酸钠（Dextran Sulfate Sodium,DSS），葡聚糖硫酸钠是一种常用的化学引导剂，不错引起急性和慢性结肠炎。DSS通过破裂肠谈上皮障蔽，激发炎症反映，模拟东谈主类炎症性肠病（如溃疡性结肠炎）的病理特征。通过DSS引导的斑马鱼肠炎模子不错用来照应肠谈炎症反映过火潜在的调节机制。

将斑马鱼饲养在要领条目下，水温28-29°C，光照周期14小时光照/10小时昏黑。如期更换水质，保抓清洁。

急性肠炎模子：

将DSS溶化在系统水中，配制成所需浓度（往往为1-3%w/v），然后将斑马鱼移动到含有DSS的水中。不错接受间歇性DSS惩处，举例每7天予以3天DSS惩处，随后4天复原期，重叠多个周期。

锻练前，禁食24h，以排除鱼肠谈内排泄物，锻练鱼用60mg/L间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐溶液浸泡麻醉5min，便捷后期药物的打针操作。用5％质地分数的葡聚糖硫酸钠（分子量为500000）水溶液（磷酸盐缓冲液配制），永别通过口腔或肛门灌输的情势将葡聚糖硫酸钠水溶液注入鱼体中，每尾鱼灌输量为100μL，分为口腔灌输组和肛门灌输组；对照组为通过口腔灌输100μL的磷酸盐缓冲液。每组100尾斑马鱼。给药后，逐日平素饲喂，同期肃穆不雅察并纪录斑马鱼的情景。另外，斑马鱼肠谈炎症可通过病理组织学进行分析，每个惩处组保证至少3尾样本。

不雅察和纪录：

如期不雅察斑马鱼的行径和外不雅变化，纪录体重、举止度、体色变化等。

使用显微镜不雅察斑马鱼肠谈的形态变化调教学生妹，如肠谈肿胀、黏膜零碎等。

炎症评分要道：

肠壁增厚、肠黏膜结构破裂以及嗜酸性粒细胞浸润3个地方进行评价，未将不解确的杯状细胞数目纳入评价地方中。肠壁厚度（0=低厚度，0～＜75μm；1=中度增厚，75～＜95μm；2=重度增厚，95～＜150μm）；黏膜层褶皱结构外不雅（0=平素外不雅；1=轻微破裂；2=严重破裂）；嗜酸性粒细胞浸润（0=险些不存在；1=中等渗入；2=严重浸润）。3个地方得分之和为0～6，0～2为无炎症或轻度炎症；3～4为中度炎症；5～6为重度炎症。

葡聚糖硫酸钠的灌输情势及鱼体表的反映

a．口腔灌输；b．肛门灌输；c．肛门灌输后出现的死鱼